打針時間一般鋪排在中午，經由10-20個小時的效應期，這樣人工授精恰好在下半夜進行，可避開陽光的照射影響。打針一般采用l毫升的打針器和4號針頭。打針器和針頭要進行煮沸消毒。打針部位以肌肉最安全，一般在背鰭前約1厘米的背中線兩側肌肉。打針時，打針器與魚體呈30度的角度進針。針頭朝親鰍頭部方向，進針深度在0.2厘米左右。為有效地控制入針的深度，可把針頭磨成0.2-0.3厘米長，或在針頭的基部套上膠管，使針頭僅露出0.2-0.3厘米。泥鰍個體小，體表粘液多而滑，不輕易捉牢。故打針時可用溫毛巾或紗布將泥鰍包住，掀開一角，使其背部露出一手輕輕握住泥鰍，另一只手打針。打針后的親鰍放入網箱或水缸內，待其發情時再撈出進行人工授精。